plexin-C1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424930-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- plexin-C1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase plexin-C1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase plexin-C1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Plxnc1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:plexin-C1 Anticorpo (B-8): sc-390216
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
plexin-C1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424930-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Plxnc1 codifica a plexina-C1, um recetor de semaforinas que converte sinais de orientação extracelulares em remodelação do citoesqueleto e em alterações da adesão e motilidade celulares. A sinalização da plexina-C1 interliga-se com vias reguladas por pequenas GTPases, influenciando a dinâmica da actina, interações dependentes de integrinas e programas de migração direcional que moldam a organização dos tecidos. Em contextos imunitários e estromais, a plexina-C1 tem sido associada à regulação do tráfego celular e à padronização do microambiente, processos frequentemente estudados em modelos de inflamação e biologia do cancro. Assim, a perturbação de Plxnc1 é útil para investigar redes de sinalização acionadas por semaforinas, comportamentos dependentes de contacto e fenótipos associados à migração em células de rato.
plexin-C1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Plxnc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Plxnc1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Plxnc1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Plxnc1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.