Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PLC δ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402474
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PLC δ1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PLC δ1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PLC δ1 Anticorpo (D-7): sc-393464
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PLC δ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402474 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PLCD1 codifica a fosfolipase C delta 1 (PLCδ1), uma enzima específica para fosfoinositídeos que hidrolisa o PIP2 para gerar os segundos mensageiros IP3 e diacilglicerol, conectando a sinalização de lipídios de membrana à liberação intracelular de Ca2+ e à ativação da proteína quinase C. Por meio desses produtos, a PLCδ1 contribui para a regulação da dinâmica do citoesqueleto, da secreção, do tráfego de membranas e da expressão gênica dependente de estímulos em diversos tipos celulares. A atividade de PLCD1 interage com redes de sinalização acopladas a GPCRs e a receptores tirosina-quinase e pode modular programas de transcrição a jusante dependentes de MAPK e de cálcio. Alterações na sinalização por fosfoinositídeos/Ca2+ envolvendo PLCD1 têm sido associadas à desregulação da proliferação, diferenciação e respostas ao estresse em múltiplos contextos relevantes para doenças, sustentando seu estudo em modelos de sinalização celular e de patologia mecanística.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PLC δ1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PLCD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PLCD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PLCD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PLC δ1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PLCD1 para a investigação da sinalização de PLC δ1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PLCD1 críticos para a função PLC δ1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PLCD1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PLC δ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PLC δ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PLCD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PLC δ1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PLC δ1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PLCD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PLCD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.