PKA Iα reg CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422400

개요

Prkar1a는 cAMP 의존성 단백질 키나아제 A(PKA)의 I형 조절 서브유닛 알파를 암호화하며, 촉매 서브유닛에 결합해 키나아제 활성을 억제하다가 cAMP가 홀로엔자임의 해리를 유도할 때까지 이를 제어하는 핵심 음성 조절자이다. PRKAR1A는 PKA 신호전달을 조절함으로써 GPCR–아데닐릴 사이클레이스–cAMP 경로 하위에서 대사, 세포주기 진행, 분화, 그리고 전사 반응을 관장하는 인산화 프로그램에 영향을 미친다. 마우스 모델에서 Prkar1a의 교란은 cAMP/PKA 경로의 역학을 변화시키며, 그 결과 CREB 조절 유전자 발현과 MAPK 관련 과정 등을 포함한 더 광범위한 신호 교차작용에 영향을 준다. PRKAR1A 및 cAMP/PKA 신호전달의 이상 조절은 내분비 및 성장 조절과 관련된 표현형과 연관되어 있어, 생체 내 및 배양 세포에서 신호전달 의존적 질병 기전을 연구하기 위한 표적으로서 의미가 있다.

PKA Iα reg CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Prkar1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Prkar1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Prkar1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PKA Iα reg 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PKA Iα reg 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Prkar1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PKA Iα reg 기능에 중요한 Prkar1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Prkar1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PKA Iα reg CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PKA Iα reg CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Prkar1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PKA Iα reg HDR 플라스미드 (m) 및 PKA Iα reg HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Prkar1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Prkar1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.