PKAγ cat CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400874

개요

PRKACG는 cAMP 의존성 단백질 키나아제 A(PKAγ)의 감마 촉매 소단위를 암호화하며, 이는 다양한 기질을 인산화하여 cAMP 신호를 세포 반응으로 전환하는 세린/트레오닌 키나아제입니다. PKAγ는 PKA 조절 소단위와 A-키나아제 고정(anchoring) 단백질에 의한 조절을 통해 신호의 구획화(compartmentalization)를 제어하는 데 기여하고, 대사, 전사 프로그램, 세포골격 역학, 이온 채널 활성 등 여러 과정을 조절합니다. 이 키나아제 활성은 GPCR–아데닐릴 사이클레이스–cAMP 신호전달 및 CREB 의존적 유전자 발현 같은 하위 경로, 그리고 MAPK 네트워크와의 크로스톡과 교차합니다. cAMP/PKA 신호의 이상 조절은 증식 신호 변화, 내분비 및 대사 교란, 신경 흥분성 변화 등 여러 질병 관련 표현형과 연관되어 있어, 인간 세포에서 PRKACG 기능에 대한 기전 연구를 뒷받침합니다.

PKAγ cat CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PRKACG 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PRKACG 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PRKACG의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PKAγ cat 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PKAγ cat 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PRKACG 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PKAγ cat 기능에 중요한 PRKACG 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PRKACG 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PKAγ cat CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PKAγ cat CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PRKACG 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PKAγ cat HDR 플라스미드 (h) 및 PKAγ cat HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PRKACG 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PRKACG 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.