Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PI 3-kinase p110β Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428980-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PI 3-kinase p110βO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PI 3-kinase p110β (m) e o Plasmídeo Double Nickase PI 3-kinase p110β (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pik3cb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PI 3-kinase p110β Anticorpo (C-8): sc-376641
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PI 3-kinase p110β Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PI 3-kinase p110β Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pik3cb codifica a subunidade catalítica p110β da fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) de classe IA, uma quinase lipídica que fosforila PIP2 para gerar PIP3 e propagar a sinalização PI3K–AKT. Em células de camundongo, a p110β contribui para a sinalização ligada a receptores de fatores de crescimento e a GPCRs, coordenando processos a jusante como sobrevivência celular, proliferação, metabolismo, tráfego vesicular e dinâmica do citoesqueleto. Ela atua em conjunto com subunidades regulatórias p85 para controlar a intensidade da via e a sinalização espacial. A desregulação de componentes da via PI3K, incluindo alterações na atividade da p110β, é amplamente estudada em contextos de crescimento celular aberrante, fenótipos metabólicos e defeitos de sinalização relacionados ao sistema imune.
PI 3-kinase p110β O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pik3cb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pik3cb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pik3cb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pik3cb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.