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PI 3-kinase p110α双切口酶质粒(h) | sc-416642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PI 3-kinase p110α双切口酶质粒(h2) | sc-416642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PIK3CA 编码 I 类磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)的催化亚基 p110α,该激酶在质膜上将 PIP2 磷酸化生成 PIP3。该脂质信号事件可募集并激活 AKT 及其下游效应分子(包括 mTOR),从而协同生长因子驱动的增殖、代谢、生存以及细胞骨架动态调控。PI3K/AKT/mTOR 信号与受体酪氨酸激酶、RAS 以及各种反馈环路相互交织,共同塑造细胞的应激反应与营养感知。PIK3CA 活性异常常被用于研究信号网络失衡背景下的致癌转化、葡萄糖利用改变以及异常细胞迁移等过程。
PI 3-kinase p110α 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PIK3CA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PIK3CA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PIK3CA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PIK3CA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。