CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
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PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432531
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 녹아웃(KO) 플라스미드 (m)은 플라스미드 풀로, 각 플라스미드는 Cas9 뉴클레아제와 표적 특이적 20nt 가이드 RNA(gRNA)를 암호화하며, GeCKO v2 라이브러리에서 유래한 서열을 사용하여 녹아웃 효율을 극대화하도록 설계되었습니다.
- gRNA 서열은 Cas9가 PI 3-kinase p100 게놈 위치에서 부위 특이적 이중 가닥 절단(DSBs)을 유도하도록 유도하며, 이는 비동종 말단 결합(NHEJ)을 통해 유전자 녹아웃을 초래합니다
- 푸로마이신 내성 및 RFP 유전자는 LoxP 사이트로 둘러싸여 있어, 안정적인 녹아웃 세포주를 확립한 후 Cre 재조합효소(Cre 벡터: sc-418923)를 통해 선택 마커를 제거할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 PI 3-kinase p100 Antibody (F-11): sc-365404
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m) | sc-432531 | 20 µg | $397.00 |
개요
Pik3c3는 class III 포스파티딜이노시톨 3-키나아제(일반적으로 PI 3-kinase p100/Vps34로도 불림)의 촉매 소단위를 암호화하며, 엔도좀 막의 정체성과 수송을 조절하기 위해 포스파티딜이노시톨 3-인산(PI3P)을 생성합니다. 마우스 세포에서 이 키나아제에 의한 PI3P 생성은 자가포식 개시, 엔도좀에서 리소좀으로의 성숙, 그리고 VPS15 및 Beclin 1과 같은 조절 파트너와의 복합체를 통한 소낭 분류에 핵심적입니다. Pik3c3 활성은 영양 상태와 스트레스 신호를 통합하여 리소좀 항상성과 세포 품질 관리를 조정하며, 단백질 항상성, 미토콘드리아 턴오버, 면역 신호전달을 포함한 과정에 영향을 줍니다. Pik3c3 기능과 연관된 엔도-리소좀 및 자가포식 경로의 이상 조절은 신경퇴행, 감염 생물학, 종양 세포 대사 맥락에서 자주 연구됩니다.
PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pik3c3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pik3c3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.
다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pik3c3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PI 3-kinase p100 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.
이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PI 3-kinase p100 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pik3c3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.
주요 특징
- PI 3-kinase p100 기능에 중요한 Pik3c3 엑손을 표적하는 sgRNA
전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pik3c3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
형질전환을 통한 전달과 호환
설계 변형
CRISPRs +/- HDR
- PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pik3c3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
PI 3-kinase p100 HDR 플라스미드 (m) 및 PI 3-kinase p100 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pik3c3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pik3c3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.