PHT2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425761

개요

Slc15a3는 양성자 결합형 히스티딘/디펩타이드 수송체 PHT2를 암호화하며, PHT2는 엔도리소좀 용질 수송과 세포내 펩타이드 처리에 관여하는 SLC15 계열의 일원이다. PHT2는 펩타이드 수송을 양성자 기울기와 결합함으로써 리소좀 항상성, 영양 감지, 그리고 골수계 및 기타 면역 관련 세포 유형에서 소포 수송과 대사 프로그램 간의 상호작용에 기여한다. SLC15 계열의 활성 변화는 선천면역 신호전달의 이상 및 염증성 상태와 연관되어 왔으며, 따라서 Slc15a3는 엔도좀/리소좀 수송이 사이토카인 반응과 항원 처리 관련 경로에 어떤 영향을 미치는지 연구하는 데 유용한 핵심 지점이다. 마우스 시스템에서 Slc15a3를 교란하면 면역 활성화와 조직 염증 모델을 형성하는 소포 pH 의존적 과정에 대한 기전적 분석이 가능하다.

PHT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Slc15a3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Slc15a3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Slc15a3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PHT2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PHT2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Slc15a3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PHT2 기능에 중요한 Slc15a3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Slc15a3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PHT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PHT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Slc15a3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PHT2 HDR 플라스미드 (m) 및 PHT2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Slc15a3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Slc15a3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.