EGF 처리된 A-431 세포를 PhosphoCruzTM 단백질 정제 시스템 sc-24964를 사용하여 처리했습니다. 그림 1: 포스포티로신 항체, sc-508로 블롯을 프로빙하여 티로신 인산화 EGFR을 검출했습니다. 레인 A/B: 결합되지 않은 컬럼 분획. 레인 C/D: 결합된 컬럼(인단백질 농축) 분획. 레인 E/F: 각각 무처리 배양액과 EGF 처리 배양액으로부터 준비된 전체 세포 용해물. 그림 2: 그림 1에 표시된 것과 동일한 샘플을 HSP 60, sc-13115에 대한 항체로 분석했습니다.
PhosphoCruz™ Protein Purification System: sc-24964
- affinity purification system devised to enrich/isolate phosphoproteins from cell lysates and tissue extracts for phosphorylation studies; proteins that carry a phosphate group are retained on the column while non-phosphorylated and undesired contaminants pass through
- typical phosphoenriched protein yield is 5-10% of total protein
- contains materials required for six individual phosphoprotein enrichment procedures including six single-use columns, 100 ml 2X Binding/Wash Buffer, 30 ml Eluting Buffer, 150 µl each Phosphatase Inhibitor Cocktails 1 and 2, and six ultrafiltration concentrators for concentrating phosphoenriched protein post-purification
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포스포크루즈 단백질 정제 시스템은 신호 전달, 대사 및 유전자 발현을 포함한 수많은 세포 과정에서 중요한 역할을 하는 인산화 단백질의 분리 및 정제를 위해 설계된 고급 도구입니다. 이 시스템은 특정 인산화 결합 도메인 또는 항체에 결합된 독점 매트릭스 물질을 활용하여 인산화 잔류물(일반적으로 인산화 세린, 트레오닌 또는 티로신)을 선택적으로 인식하고 결합하는 특수한 친밀도 크로마토그래피 기법을 활용합니다. 포스포크루즈 시스템의 주요 작용 메커니즘은 크로마토그래피 매트릭스에서 관심 있는 인산화 단백질과 고정화된 포획제 간의 상호작용을 포함합니다. 정제 과정에서 세포 용해물 또는 기타 단백질 용액은 매트릭스가 포함된 컬럼을 통과합니다. 인산화 단백질은 인산화 상태에 따라 컬럼에 선택적으로 유지되고, 인산화되지 않은 단백질은 씻겨 내려갑니다. 그런 다음 인산염 그룹과 결합제 사이의 상호작용을 방해하는 특정 조건(일반적으로 염 농도 또는 pH를 변경)에서 결합된 단백질을 용출할 수 있습니다. 이 방법은 단백질 인산화의 역할을 이해하는 것이 중요한 단백질 기능 및 신호 경로를 연구하는 연구 환경에서 매우 유용합니다. 포스포크루즈™ 시스템은 인산화 단백질의 연구뿐만 아니라 치료 또는 임상 적용 없이도 다양한 자극에 대한 반응 또는 다양한 세포 상태에서 발생하는 잠재적인 단백질 변형을 식별하는 데 도움을 줍니다.
PhosphoCruz™ Protein Purification System 참고문헌:
- 오로라-A 유전자의 높은 복제 증폭은 인간 대장암의 염색체 불안정성 표현형과 관련이 있습니다. | Nishida, N., et al. 2007. Cancer Biol Ther. 6: 525-33. PMID: 17457043
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
PhosphoCruz™ Protein Purification System | sc-24964 | 6 purifications | $295.00 |