PHF6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427858

Descripción general

Phf6 de ratón codifica PHF6, una proteína nuclear con un dedo de zinc tipo PHD que actúa como regulador asociado a la cromatina de la transcripción y de la biogénesis de ARN. PHF6 participa en el control epigenético de la expresión génica mediante interacciones con complejos de remodelación de la cromatina y de modificación de histonas, influyendo en programas transcripcionales específicos de linaje, la progresión del ciclo celular y la diferenciación. La alteración de las redes reguladoras dependientes de PHF6 se ha relacionado con cambios en procesos hematopoyéticos y del neurodesarrollo, lo que convierte a Phf6 en un punto de interés para estudiar la desregulación transcripcional. En modelos murinos, la perturbación de Phf6 se investiga habitualmente en el contexto de la estabilidad del genoma, la organización de la cromatina y firmas de expresión génica relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PHF6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Phf6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Phf6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Phf6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PHF6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Phf6 para la investigación de la señalización de PHF6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Phf6 críticos para la función de PHF6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Phf6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PHF6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PHF6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Phf6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PHF6 (m) y el plásmido HDR PHF6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Phf6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Phf6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.