PHF14 Plasmide Double Nickase (h): sc-411313-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PHF14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PHF14 Double Nickase Plasmid (h) e il PHF14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PHF14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PHF14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHF14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF14 (PHD finger protein 14) è un fattore nucleare associato alla cromatina, implicato nella regolazione trascrizionale attraverso il riconoscimento di marcatori istonici e la modulazione dell’accessibilità della cromatina. Partecipa a programmi di regolazione genica che influenzano la proliferazione e la differenziazione cellulare, nonché stati trascrizionali specifici di linea, collegandosi così a vie di controllo dello sviluppo e dell’epigenetica. Un’attività alterata di PHF14 è stata associata a reti di espressione deregolate pertinenti alla segnalazione oncogenica e al rimodellamento tissutale, rendendolo di interesse negli studi di biologia tumorale e plasticità cellulare. Nelle cellule umane, PHF14 rappresenta un punto d’ingresso pratico per analizzare come i “lettori” della cromatina plasmino gli output trascrizionali e i fenotipi a valle.
PHF14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PHF14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PHF14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PHF14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PHF14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.