PHF14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411313

Visão geral

PHF14 (proteína 14 com dedo PHD) codifica um regulador associado à cromatina, implicado no controle da transcrição por meio do reconhecimento de modificações de histonas e da coordenação de estados epigenéticos. Tem sido associado à regulação de programas de diferenciação celular, à progressão do ciclo celular e a redes de expressão gênica que moldam a organização do citoesqueleto e a sinalização do desenvolvimento. Ao modular a acessibilidade da cromatina, o PHF14 influencia vias envolvidas na especificação de linhagem e na homeostase tecidual, com relevância para a regulação transcricional aberrante observada no câncer e em distúrbios do desenvolvimento. Pesquisas sobre PHF14 sustentam seu uso como um nó para dissecar fenótipos dirigidos pela cromatina, como proliferação e migração alteradas e expressão gênica dependente do contexto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PHF14 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PHF14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PHF14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PHF14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PHF14.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PHF14 para a investigação da sinalização de PHF14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PHF14 críticos para a função PHF14
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PHF14 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PHF14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PHF14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PHF14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PHF14 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PHF14 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PHF14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PHF14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.