Perilipin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401305

개요

PLIN1은 지질방울(lipid droplet) 관련 인산화 단백질인 페릴리핀-1(perilipin-1)을 암호화하며, 지질분해효소가 방울 표면에 접근하는 것을 조절함으로써 지방세포의 중성지방 저장과 지방분해(lipolysis)를 조절합니다. 페릴리핀은 cAMP/PKA 의존적 인산화 사건을 지방조직의 지질 동원과 연결하고, ABHD5/CGI-58 같은 보조인자 및 ATGL, HSL을 포함한 효소들과의 상호작용을 조율합니다. 지질방울의 생성과 turnover에서의 역할을 통해 PLIN1은 세포 에너지 항상성, 지방산 플럭스, 그리고 아디포카인(adipokine) 연관 대사 신호전달에 영향을 미칩니다. PLIN1의 유전적·기능적 변화는 지질이영양증(lipodystrophy) 양상과 대사 이상을 포함한 인간 지방조직 기능장애와 연관되어 왔으며, 관련 세포 모델에서 지질 처리 과정을 연구하는 유용한 표적이 됩니다.

Perilipin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PLIN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PLIN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PLIN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Perilipin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Perilipin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PLIN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Perilipin 기능에 중요한 PLIN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PLIN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Perilipin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Perilipin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PLIN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Perilipin HDR 플라스미드 (h) 및 Perilipin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PLIN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PLIN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.