Pepsin A4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-418415

개요

PGA4는 위 점막에서 분비형 자이모겐(불활성 전구효소)으로 생성되며, 산성 조건에서 활성화되어 식이성 및 내인성 단백질을 절단하는 아스파르트산성 엔도펩티다아제인 펩신 A4를 암호화한다. 펩신 계열의 일원으로서 펩신 A4는 위장관 단백질 항상성(proteostasis)에 기여하며, 펩타이드 생성, 장내강(lumen) 단백질 소화, 그리고 그에 따른 항원 및 영양소 가용성에 영향을 준다. 이 효소의 활성은 위산 생물학 및 점막 장벽 과정과 통합되어 있으며, 발현 변화나 프로테아제 균형의 변화는 위 상피 재형성과 염증 연관 병리 연구에서 흔히 평가된다. 따라서 PGA4는 위에서의 프로테아제 의존성 경로를 규명하고, 위 질환 맥락에서의 바이오마커 지향 연구에 활용 가치가 있다.

Pepsin A4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PGA4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PGA4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PGA4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Pepsin A4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Pepsin A4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PGA4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Pepsin A4 기능에 중요한 PGA4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PGA4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Pepsin A4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Pepsin A4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PGA4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Pepsin A4 HDR 플라스미드 (h) 및 Pepsin A4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PGA4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PGA4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.