Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDK4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401355-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- PDK4 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- PDK4 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 PDK4 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 PDK4을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 PDK4 Antibody (A-7): sc-518103
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
PDK4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-401355-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDK4 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-401355-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDK4는 피루브산 탈수소효소 키나아제 4(pyruvate dehydrogenase kinase 4)를 암호화하며, 이는 미토콘드리아 효소로서 피루브산 탈수소효소 복합체(pyruvate dehydrogenase complex)를 인산화해 억제합니다. 그 결과 피루브산이 아세틸‑CoA로 전환되는 과정이 감소하고, 탄소 흐름이 포도당 산화에서 지방산 이용 쪽으로 전환됩니다. PDK4의 발현은 영양 상태와 호르몬에 의해 조절되며, PPAR 신호전달, 인슐린/FOXO 매개 전사 조절, 세포 에너지 감지 등 미토콘드리아 대사를 조절하는 경로들로부터의 신호를 통합합니다. PDK4 활성의 변화는 인슐린 저항성, 비만, 제2형 당뇨병, 심장 대사 스트레스 등 다양한 상황에서 관찰되는 대사 재편성과 미토콘드리아 기질 전환과 연관되어 있습니다. PDK4는 산화적 인산화로 유입되는 기질과 아세틸‑CoA의 가용성에 영향을 미치기 때문에, 대사 적응, 산화 스트레스, 염증과 연관된 에너지 대사 재배선 모델에서 자주 연구됩니다.
PDK4 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 PDK4 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 PDK4 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 PDK4의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, PDK4 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.