PDK1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-401084-KO-2

개요

인간 PDK1(피루브산 탈수소효소 키나아제 1) 유전자는 미토콘드리아 키나아제를 암호화하며, 이 효소는 피루브산 탈수소효소 복합체(PDH complex)를 인산화하여 억제함으로써 피루브산이 아세틸-CoA로 전환되는 과정을 제한하고, 탄소 흐름을 TCA 회로로부터 멀어지게 합니다. 포도당 산화와 젖산 생성 간의 균형을 조절함으로써 PDK1은 영양분 감지와 저산소 반응성 대사 재프로그래밍을 통합하고, 산화 스트레스에 대한 적응을 뒷받침합니다. 또한 해당 활성은 해당과정, 미토콘드리아 호흡, 아나플레로시스(anaplerosis) 등 중심 대사 경로들과 교차하며, 세포 증식 및 생존의 결정에 영향을 미칩니다. PDK1의 발현 또는 활성의 이상 조절은 여러 질병 맥락에서 관찰되는 생체에너지 변화와 연관되어 왔으며, 대사 구동형 표현형의 기전 연구에서 중요한 표적으로 여겨집니다.

PDK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 PDK1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PDK1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PDK1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PDK1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PDK1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PDK1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PDK1 기능에 중요한 PDK1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PDK1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PDK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PDK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PDK1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PDK1 HDR 플라스미드 (h) 및 PDK1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PDK1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PDK1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.