Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDH-E1α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401044-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDH-E1αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDH-E1α (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDH-E1α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PDHA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDH-E1α Anticorpo (D-6): sc-377092
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDH-E1α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDH-E1α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O PDHA1 codifica a subunidade E1α do complexo piruvato desidrogenase (PDH), que catalisa a descarboxilação oxidativa do piruvato para gerar acetil-CoA e fazer a ligação entre a glicólise e o ciclo do ácido tricarboxílico. A atividade da PDH-E1α sustenta a respiração mitocondrial, regula o fluxo de carbono para a biossíntese de lipídios e influencia o equilíbrio redox por meio da produção downstream de NADH. O PDHA1 é regulado por quinases e fosfatases da PDH, que ajustam a atividade do complexo PDH em resposta à disponibilidade de nutrientes e à demanda energética celular. Alterações na função do PDHA1 estão associadas à remodelação metabólica e à disfunção mitocondrial, sendo estudadas em contextos como acidose láctica, fenótipos do neurodesenvolvimento e bioenergética alterada em modelos de doenças proliferativas.
PDH-E1α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PDHA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PDHA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PDHA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PDHA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.