PDE3B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401773

개요

PDE3B는 사이클릭 뉴클레오타이드 미세구획(microdomain)을 형성하고 PKA 및 PKG 의존적 신호전달을 조절하는, 이중 특이성 cAMP/cGMP 가수분해효소인 포스포디에스터레이스 3B를 암호화합니다. 지방세포와 간세포에서 PDE3B는 인슐린과 카테콜아민 신호 입력을 통합하여 PI3K–AKT 및 그 하위 인산화 네트워크를 포함한 경로를 통해 지질분해, 포도당신생합성 프로그램, 에너지 저장을 조절합니다. 췌장 β세포에서는 인슐린 과립의 외배출에 영향을 주는 cAMP 역학을 미세 조정함으로써 자극-분비 연결을 조절합니다. PDE3B 활성의 이상 조절은 인슐린 민감성, 비만 관련 신호전달, 지질 항상성과 관련된 대사 표현형과 연관되어 왔으며, 내분비 및 심장대사 생물학의 기전 연구에서 유용한 표적으로서의 가치를 뒷받침합니다.

PDE3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PDE3B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PDE3B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PDE3B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PDE3B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PDE3B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PDE3B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PDE3B 기능에 중요한 PDE3B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PDE3B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PDE3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PDE3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PDE3B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PDE3B HDR 플라스미드 (h) 및 PDE3B HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PDE3B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PDE3B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.