PCMT1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-418153

개요

PCMT1은 단백질 L-아이소아스파르트산(D-아스파르트산) O-메틸트랜스퍼레이스 1을 암호화하며, 이는 SAM 의존적 메틸트랜스퍼레이스로서 단백질에서 노화 또는 스트레스로 인해 생기는 아이소아스파르틸 손상을 복구합니다. 이 효소는 비정상적인 Asp/Asn 잔기를 메틸화해 정상적인 결합 형태로 되돌아가도록 전환을 촉진합니다. 이러한 단백질 품질관리 기능은 단백질 항상성(proteostasis)을 뒷받침하고 기능 이상 및 응집(aggregation)되기 쉬운 단백질의 축적을 제한하여, PCMT1을 산화 스트레스에 대한 세포 반응 및 세포질과 핵에서의 장수명 단백질 유지와 연결합니다. PCMT1의 기능은 단백질 턴오버, 샤페론 네트워크, 스트레스 내성을 조절하는 경로들과 맞물려 있어, 단백질 노화와 번역 후 손상 연구에서 중요한 표적이 됩니다. PCMT1 활성의 변화는 단백질 손상과 손상 복구 기전의 저하가 세포 기능 장애에 기여하는 신경생물학 및 기타 질환 맥락에서 연구되어 왔습니다.

PCMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PCMT1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PCMT1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PCMT1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PCMT1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PCMT1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PCMT1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PCMT1 기능에 중요한 PCMT1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PCMT1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PCMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PCMT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PCMT1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PCMT1 HDR 플라스미드 (h) 및 PCMT1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PCMT1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PCMT1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.