Plasmide Double Nickase (h) PCGF5: sc-416432-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PCGF5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PCGF5 Double Nickase (h) et le plasmide PCGF5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PCGF5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PCGF5 | sc-416432-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCGF5 (polycomb group ring finger 5) code une protéine à doigt RING qui s’associe aux complexes du groupe Polycomb et contribue à la répression génique dépendante de la chromatine. En régulant les modifications des histones et l’architecture de la chromatine à un niveau supérieur, PCGF5 aide à contrôler des programmes transcriptionnels impliqués dans l’identité cellulaire, la différenciation et la mise en place des patrons du développement. PCGF5 a été associé à des voies de silenciation médiées par Polycomb qui s’entrecroisent avec le contrôle du cycle cellulaire et la spécification des lignées, des processus souvent perturbés dans les contextes de cancer et de maladies neurodéveloppementales. Ses interactions moléculaires au sein d’assemblages apparentés à PRC1 en font une cible utile pour analyser la régulation épigénétique des réseaux de gènes dans les cellules humaines.
PCGF5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PCGF5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PCGF5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PCGF5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PCGF5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.