Pcdhb3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430065

개요

Pcdhb3는 칼슘 의존적 세포–세포 접착과 신경세포 정체성 확립에 관여하는 것으로 알려진 클러스터형 프로토카드헤린(protocadherin) 계열의 구성원인 프로토카드헤린 베타 3을 암호화합니다. 신경계에서 프로토카드헤린은 시냅스 형성, 신경돌기(neurite) 성장, 그리고 신경 회로 연결성을 정교하게 다듬는 자기-회피(self-avoidance) 기전에 기여합니다. Pcdhb3의 기능은 막 접착 복합체 및 그 하위의 세포골격 조직화 과정과 연관되어, 수상돌기와 축삭의 패터닝을 형성하는 데 영향을 줍니다. 프로토카드헤린 유전자 클러스터의 조절 이상은 신경발달 경로의 변화 및 시냅스 기능 장애와 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 이는 회로 조립과 신경학적 표현형을 연구하는 모델에서 Pcdhb3를 조사할 필요성을 뒷받침합니다.

Pcdhb3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pcdhb3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pcdhb3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pcdhb3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Pcdhb3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Pcdhb3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pcdhb3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Pcdhb3 기능에 중요한 Pcdhb3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pcdhb3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Pcdhb3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Pcdhb3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pcdhb3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Pcdhb3 HDR 플라스미드 (m) 및 Pcdhb3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pcdhb3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pcdhb3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.