PBR CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419383

개요

마우스 Tspo는 말초 벤조디아제핀 수용체(PBR)를 암호화하며, PBR은 주로 미토콘드리아 외막에 존재하는 18 kDa 단백질로 콜레스테롤과 포르피린에 결합하고 미토콘드리아 항상성 유지에 기여합니다. PBR은 콜레스테롤 수송과 스테로이드 생성 대사에 관여하고, 미토콘드리아 막 투과성과 세포사멸(apoptosis) 관련 신호를 조절하며, 활성산소종(ROS) 균형과 염증 반응에도 영향을 미칩니다. Tspo/PBR 발현은 활성화된 미세아교세포와 말초 면역세포에서 높게 나타나며, 신경염증의 표지자로 널리 사용됩니다. 또한 신경퇴행성 질환과 대사성 스트레스 상황에서 관찰되는 미토콘드리아 기능장애와도 관련성이 있습니다. 이러한 기능들로 인해 Tspo는 세포 스트레스를 면역 활성화 및 조직 재형성과 연결하는 미토콘드리아 연계 신호 네트워크를 분석하는 데 유용한 핵심 요소가 됩니다.

PBR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tspo 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tspo 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tspo의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PBR 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PBR 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tspo 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PBR 기능에 중요한 Tspo 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tspo 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PBR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PBR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tspo 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PBR HDR 플라스미드 (m) 및 PBR HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tspo 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tspo 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.