Pax-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-402171-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pax-2O plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Pax-2 (h2) e o Plasmídeo Double Nickase Pax-2 (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PAX2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pax-2 Anticorpo (60-P): sc-130387
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pax-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O PAX2 humano codifica o fator de transcrição Pax-2, da família paired box, um regulador de ligação ao DNA essencial para o padrão embrionário e a especificação de linhagens, particularmente no desenvolvimento dos rins, do trato urogenital e do sistema nervoso central. O Pax-2 controla programas transcricionais dependentes do contexto ao reconhecer sítios de ligação do paired box e ao coordenar-se com a cromatina e com complexos correpressores e coativadores para influenciar a diferenciação epitelial, a morfogênese e a proliferação durante a organogênese. A expressão desregulada ou alterações genéticas em PAX2 estão ligadas a anomalias congênitas do rim e do trato urinário e têm sido associadas a estados transcricionais oncogênicos em diversos contextos tumorais, tornando-o relevante para estudos de redes regulatórias gênicas do desenvolvimento e de mecanismos de doença. Reagentes de edição gênica para PAX2 permitem knockout, knock-in ou a perturbação de elementos regulatórios de forma direcionada para investigar vias dependentes de Pax-2, mapear alvos a jusante e modelar fenótipos do desenvolvimento e associados à transformação em células humanas.
Pax-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PAX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PAX2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PAX2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PAX2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.