PARP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406615

概要

PARP4は、DNA損傷や遺伝毒性ストレスに対する細胞応答に関与するADP-リボシル基転移酵素であるポリ（ADP-リボース）ポリメラーゼファミリーの一員、poly(ADP-ribose) polymerase family member 4（PARP-4）をコードします。PARP-4は、DNA修復経路やチェックポイント経路と連動するポリ（ADP-リボシル）化依存的シグナル伝達を介して、クロマチン動態の制御およびゲノム恒常性の維持に関与するとされています。PARP4の活性や発現の変化は複数のがん関連データセットで報告されており、腫瘍に関連するDNA損傷耐性やストレス適応を研究するうえでの重要性が示唆されます。またPARP-4は、ヒト細胞におけるADP-リボシル化、複製ストレス、転写制御の相互作用（クロストーク）を解明するための機序的な結節点としても用いられています。

PARP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPARP4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PARP4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PARP4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PARP-4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PARP-4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PARP4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PARP-4の機能に不可欠なPARP4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PARP4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PARP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPARP-4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PARP4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PARP-4 HDRプラスミド（h）および PARP-4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPARP4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPARP4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。