PARP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-437160

概要

Parp10 は、ADPリボシル化を介してタンパク質機能を調節するモノADPリボシル基転移酵素 PARP-10 をコードしており、タンパク質の安定性、細胞内局在、シグナル伝達の出力に影響を与えます。PARP-10 は DNA 損傷応答の制御、複製ストレス耐性、クロマチン関連プロセスに関与することが示されており、ユビキチン依存的なタンパク質制御や他の翻訳後修飾ネットワークと統合的に機能します。マウス系では、PARP-10 活性はゲノム維持、細胞周期進行、細胞恒常性を形成するストレス適応シグナル伝達の文脈で研究されることが一般的です。ADPリボシル化経路の破綻は、異常増殖や炎症性シグナルと広く関連しているため、Parp10 は疾患関連モデルにおける経路間クロストークの機構解明研究に有用なノードとなります。

PARP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるParp10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Parp10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Parp10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PARP-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PARP-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Parp10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PARP-10の機能に不可欠なParp10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Parp10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PARP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPARP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Parp10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PARP-10 HDRプラスミド（m）および PARP-10 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはParp10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のParp10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。