PAR-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420266

개요

마우스 F2rl2는 프로테아제-활성화 수용체-3(PAR-3)를 암호화하며, PAR-3는 세포외 프로테아제 신호전달 및 응고 관련 자극 환경에서 활성화되는 GPCR 계열의 일원입니다. PAR-3는 삼량체 G-단백질 신호전달을 유도할 수 있는 프로테아제-활성화 수용체 네트워크에 참여하며, 반응하는 세포 유형에서 칼슘 유입(플럭스), MAPK 반응, 세포골격 재구성을 포함한 하위 경로를 조절합니다. 마우스 시스템에서 F2rl2는 혈관 및 염증 생물학, 혈소판 관련 신호전달, 그리고 조직 미세환경 내 기질–면역 간 커뮤니케이션에서의 역할로 연구됩니다. 프로테아제 수용체 신호전달의 조절 이상은 혈전증, 염증, 암 생물학 모델과 관련이 있으며, 수용체 발현 또는 신호 강도의 변화가 세포 이동과 장벽 관련 과정들을 재편할 수 있습니다.

PAR-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 F2rl2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 F2rl2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 F2rl2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAR-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAR-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 F2rl2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAR-3 기능에 중요한 F2rl2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 F2rl2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAR-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PAR-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 F2rl2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAR-3 HDR 플라스미드 (m) 및 PAR-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 F2rl2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 F2rl2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.