PAP-β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403907

개요

PAPOLB는 비정형 폴리아데닐화 효소인 poly(A) polymerase beta(PAP-β)를 암호화하며, 남성 생식세포에서 발현이 풍부하고 정자발생 과정에서 전사 후(post-transcriptional) 조절을 뒷받침합니다. PAP-β는 특정 mRNA의 poly(A) 꼬리를 연장함으로써 전사체의 안정성, 핵 밖으로의 수출, 번역 활성화에 영향을 주고, 더 넓은 RNA 처리 네트워크 및 mRNA 감시(mRNA surveillance) 체계와도 통합적으로 작동합니다. PAPOLB 활성이 변화하면 정자 발달 결함 및 생식능 저하 표현형과 연관되는 것으로 보고되어, 생식계열 유전자 조절 연구에서 중요한 표적이 됩니다. 또한 PAPOLB는 특수화된 poly(A) 중합효소가 단계 특이적 유전자 발현 프로그램을 어떻게 형성하는지 분석하는 모델로도 활용됩니다.

PAP-β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PAPOLB 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PAPOLB 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PAPOLB의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAP-β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAP-β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PAPOLB 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAP-β 기능에 중요한 PAPOLB 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PAPOLB 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAP-β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PAP-β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PAPOLB 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAP-β HDR 플라스미드 (h) 및 PAP-β HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PAPOLB 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PAPOLB 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.