Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405925

Übersicht

PANX2 kodiert Pannexin‑2, ein kanalbildendes Protein der Plasmamembran, das die Freisetzung von ATP und anderen kleinen Molekülen vermittelt und so autokrine und parakrine Signalübertragung koordiniert. Pannexin‑2 trägt zu purinergen Signalnetzwerken bei, die die intrazelluläre Calciumdynamik, inflammasomassoziierte Antworten und die Kommunikation zwischen Neuronen und Glia beeinflussen, und verknüpft damit die Kanalaktivität mit zellulärem Stress und der Modulation der angeborenen Immunantwort. Die Expression ist im Nervensystem angereichert und wurde im Kontext von Neuroinflammation, exzitotoxischer Schädigung und verändertem Tumorzellverhalten untersucht, wobei extrazelluläre Nukleotidsignale Proliferation und Signale aus dem Mikromilieu neu ausrichten können. Diese Eigenschaften machen PANX2 zu einem nützlichen Ziel, um zu untersuchen, wie Membrankanäle metabolischen Stress mit inflammatorischen und synaptischen Signalwegen integrieren.

Das Pannexin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PANX2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PANX2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PANX2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Pannexin-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PANX2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Pannexin-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PANX2-Exone abzielen, die für die Pannexin-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PANX2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Pannexin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Pannexin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PANX2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Pannexin-2 HDR-Plasmid (h) und Pannexin-2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PANX2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PANX2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.