Pannexin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405925
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pannexin-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pannexin-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pannexin-2 Anticorpo (2B11): sc-517064
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pannexin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405925 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PANX2 codifica a panexina-2, uma proteína formadora de canais na membrana plasmática que medeia a liberação de ATP e de outras pequenas moléculas para coordenar a sinalização autócrina e parácrina. A panexina-2 contribui para redes de sinalização purinérgica que influenciam a dinâmica do cálcio intracelular, respostas associadas ao inflamassoma e a comunicação neurônio–glia, ligando a atividade do canal ao estresse celular e à modulação da imunidade inata. Sua expressão é enriquecida no sistema nervoso e tem sido investigada em contextos de neuroinflamação, lesão excitotóxica e comportamento tumoral alterado, nos quais a sinalização por nucleotídeos extracelulares pode remodelar a proliferação e sinais do microambiente. Essas propriedades tornam o PANX2 um alvo útil para dissecar como canais de membrana integram estresse metabólico a vias inflamatórias e sinápticas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pannexin-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PANX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PANX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PANX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pannexin-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PANX2 para a investigação da sinalização de Pannexin-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PANX2 críticos para a função Pannexin-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PANX2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pannexin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pannexin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PANX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pannexin-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pannexin-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PANX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PANX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.