PAK5CRISPR激活质粒(h): sc-404073-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PAK5 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- PAK5 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 PAK5 CRISPR 激活质粒 (h) 和 PAK5 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 PAK5 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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PAK5CRISPR激活质粒(h) | sc-404073-ACT | 20 µg | $397.00 |
PAK5（p21 激活激酶 5；PAK7）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，也是 CDC42、RAC1 等 Rho 家族 GTP 酶的下游效应分子，参与调控细胞骨架重塑、细胞极性以及生存信号通路。在人类细胞中，PAK5 会影响肌动蛋白动态变化与微管稳定性，从而塑造神经突起生长、细胞迁移和囊泡运输等过程。它与 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 相关网络相互连接，并可调节底物的磷酸化，以协调细胞黏附与运动。已有研究报道 PAK5 的表达或信号异常在多种肿瘤背景中出现；同时由于其在神经元发育和突触功能中的作用，PAK5 也与神经生物学密切相关。
PAK5 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PAK5的表达。
PAK5 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的PAK5基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于PAK5转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性PAK5表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的PAK5位点，并能够研究内源性位点上依赖于PAK5的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PAK5表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PAK5通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。