Paf1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417797

개요

PAF1는 RNA 중합효소 II 결합 인자 1 복합체(PAF1C)의 핵심 소단위인 Paf1을 암호화하며, 이 복합체는 전사 신장 과정과 전사 동반 RNA 처리 및 염색질 조절을 조정합니다. PAF1C는 Pol II 및 신장 기계와의 상호작용을 통해 프로모터 근접 정지(promoter-proximal pausing), mRNA 3′ 말단 형성, 그리고 활성 전사와 연관된 히스톤 표지의 부가에 영향을 미치는데, 여기에는 H3K4 및 H3K36 메틸화가 포함됩니다. Paf1은 전사–복제 충돌과 DNA 손상 반응을 조절함으로써 게놈 안정성에 기여하며, 세포 주기와 분화 프로그램의 조절에도 관여합니다. PAF1C 활성의 이상 및 PAF1 발현 변화는 여러 암을 비롯해 후성유전 및 전사 조절 이상이 수반되는 다양한 질환에서 관찰되는 비정상적 전사 프로그램과 연관되어 왔습니다.

Paf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PAF1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PAF1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PAF1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Paf1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Paf1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PAF1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Paf1 기능에 중요한 PAF1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PAF1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Paf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Paf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PAF1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Paf1 HDR 플라스미드 (h) 및 Paf1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PAF1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PAF1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.