Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PAC-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401917
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAC-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAC-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PAC-1 Anticorpo (4O21): sc-32776
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAC-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401917 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A fosfatase de dupla especificidade 2 (DUSP2), também conhecida como PAC-1, é uma fosfatase de MAP quinases que desfosforila ERK1/2 e p38 ativadas, moldando assim a magnitude e a duração da sinalização por MAPK. Em contextos imunológicos e hematopoéticos humanos, a DUSP2 contribui para o controle dependente de estímulo de programas transcricionais induzidos por citocinas, bem como de proliferação e apoptose, atuando como reguladora de retroalimentação negativa das cascatas de MAPK. Sua expressão costuma ser induzível em linfócitos ativados e pode modular vias a jusante ligadas à sinalização inflamatória e às respostas ao estresse. A atividade ou expressão desregulada de DUSP2 tem sido associada a disfunção imune e a fenótipos de sinalização relacionados ao câncer, tornando-a um ponto útil para estudos mecanísticos do controle da via de MAPK.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAC-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DUSP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DUSP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DUSP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAC-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DUSP2 para a investigação da sinalização de PAC-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DUSP2 críticos para a função PAC-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DUSP2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAC-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PAC-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DUSP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAC-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PAC-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DUSP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DUSP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.