p57 Kip2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400444-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p57 Kip2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase p57 Kip2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase p57 Kip2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDKN1C. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p57 Kip2 Anticorpo (KP39): sc-56341
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p57 Kip2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400444-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p57 Kip2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400444-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDKN1C codifica o inibidor de quinases dependentes de ciclina p57 Kip2, um importante regulador negativo da progressão G1/S que limita a atividade das CDKs para impor a saída do ciclo celular e sustentar a diferenciação. Como gene imprintado expresso predominantemente a partir do alelo materno, o CDKN1C ajuda a coordenar programas de crescimento durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual, interagindo com vias que regulam proliferação, apoptose e comprometimento de linhagem. Alterações na expressão ou na função de CDKN1C estão associadas a controle de crescimento desregulado e têm sido implicadas em fenótipos de supercrescimento do desenvolvimento e na biologia tumoral, tornando-o um nó útil para estudar checkpoints do ciclo celular. Em células humanas, p57 Kip2 também está ligado a estados semelhantes à senescência e a respostas dependentes do contexto à sinalização mitogênica e ao estresse.
p57 Kip2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDKN1C em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDKN1C. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDKN1C. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDKN1C interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.