P2Y5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-426423

개요

Lpar6는 리소포스파티딜산(LPA)에 반응하는 G 단백질 결합 수용체인 P2Y5 수용체를 암호화하며, 지질 매개체 감지와 더불어 세포골격 역학, 세포 극성, 분화를 조절하는 경로를 통한 하위 신호전달에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 마우스 조직에서 P2Y5 활성은 세포외 LPA를 세포내 2차 전달자 네트워크와 연결하여 MAPK 및 Rho 계열 신호 출력에 영향을 줄 수 있고, 그 결과 상피 조직화나 모낭 생물학과 같은 과정이 형성됩니다. 유전학적·기능적 연구들은 LPAR6/P2Y5가 모발 성장 표현형 및 외배엽 발달과 연관됨을 시사하며, 변화된 LPA 수용체 신호는 염증성 및 섬유화성 미세환경 전반과도 폭넓게 관련됩니다. 따라서 Lpar6는 생리적으로 관련성 있는 모델에서 GPCR 주도 지질 신호전달과 그것이 세포 행동에 미치는 영향을 분석하는 데 유용한 출발점이 됩니다.

P2Y5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Lpar6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Lpar6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Lpar6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P2Y5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P2Y5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Lpar6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P2Y5 기능에 중요한 Lpar6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Lpar6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P2Y5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 P2Y5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Lpar6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P2Y5 HDR 플라스미드 (m) 및 P2Y5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Lpar6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Lpar6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.