P2Y11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405745

概要

P2RY11は、ATP/UTPに応答するGタンパク質共役型受容体（GPCR）であるヒトP2Y11受容体をコードしており、GqシグナルとGsシグナルの両方に結合するという特徴を有します。細胞外ヌクレオチド刺激により、P2Y11はホスホリパーゼC（PLC）の活性化を促進して細胞内Ca²⁺動員を引き起こすとともに、cAMPを増加させます。これにより、プリン作動性入力がMAPK/ERKなどのセカンドメッセンジャー経路と統合され、免疫細胞の活性化やサイトカインプログラムを規定します。P2Y11は複数の白血球集団で発現しており、炎症性微小環境における樹状細胞、単球、T細胞応答の調節に関与するとされています。P2Y11が関わるプリン作動性シグナルの破綻は、炎症性および自己免疫性の表現型と関連づけられており、免疫代謝、神経炎症、腫瘍—免疫相互作用モデルにおける研究対象として注目されています。

P2Y11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるP2RY11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、P2RY11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、P2RY11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、P2Y11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、P2Y11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、P2RY11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• P2Y11の機能に不可欠なP2RY11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、P2RY11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• P2Y11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびP2Y11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、P2RY11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  P2Y11 HDRプラスミド（h）および P2Y11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはP2RY11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のP2RY11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。