p22-phox CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400325

개요

CYBA는 식세포 NADPH 산화효소(NOX2) 복합체의 필수 막 소단위인 p22-phox를 암호화하며, gp91-phox/NOX2를 안정화하고 식포막과 세포막에서 활성 산화효소가 조립되도록 돕습니다. p22-phox는 전자를 분자 산소로 전달할 수 있게 함으로써, 항미생물 방어와 선천면역세포의 산화환원(redox) 의존적 신호전달에 기여하는 조절된 활성산소종(ROS) 생성에 필수적입니다. CYBA 의존적 ROS는 식작용, 염증 매개체 생성, 산화폭발(oxidative burst) 역학과 연결된 경로에 영향을 미칩니다. CYBA의 유전적 교란 또는 발현 변화는 NOX 활성 저하와 연관되며, 만성 육아종병(CGD) 유사 표현형, 염증 조절 이상, 산화스트레스 관련 세포 반응의 맥락에서 연구되고 있습니다.

p22-phox CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CYBA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CYBA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CYBA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 p22-phox 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 p22-phox 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CYBA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• p22-phox 기능에 중요한 CYBA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CYBA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• p22-phox CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 p22-phox CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CYBA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  p22-phox HDR 플라스미드 (h) 및 p22-phox HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CYBA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CYBA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.