Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
p22-phox Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400325
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p22-phox O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p22-phox, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p22-phox Anticorpo (E-11): sc-271968
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p22-phox Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400325 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CYBA codifica a p22-phox, uma subunidade essencial de membrana do complexo NADPH oxidase (NOX2) dos fagócitos, que estabiliza a gp91-phox/NOX2 e dá suporte à montagem da oxidase ativa nas membranas fagossomal e plasmática. Ao possibilitar a transferência de elétrons para o oxigênio molecular, a p22-phox é necessária para a produção regulada de espécies reativas de oxigênio (ROS), que contribui para a defesa antimicrobiana e para a sinalização dependente de estado redox em células da imunidade inata. As ROS dependentes de CYBA influenciam vias ligadas à fagocitose, à produção de mediadores inflamatórios e à dinâmica do burst oxidativo. A interrupção genética ou a expressão alterada de CYBA está associada à atividade reduzida de NOX e é estudada no contexto de fenótipos semelhantes à doença granulomatosa crônica, desregulação inflamatória e respostas celulares relacionadas ao estresse oxidativo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p22-phox (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CYBA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CYBA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CYBA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p22-phox.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CYBA para a investigação da sinalização de p22-phox, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CYBA críticos para a função p22-phox
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CYBA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p22-phox Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo p22-phox Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CYBA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p22-phox Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR p22-phox (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CYBA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CYBA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.