OTULIN CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-436617

개요

Otulin은 LUBAC 복합체가 생성하는 Met1(선형) 결합 유비퀴틴 사슬을 선택적으로 가수분해하는 탈유비퀴틴화 효소인 OTULIN을 암호화하며, 이를 통해 유비퀴틴 의존적 신호 전달의 전개 양상을 조절합니다. 마우스 세포에서 OTULIN은 RIPK1, NEMO/IKBKG 등 경로 구성요소의 선형 유비퀴틴화를 조절함으로써 NF-κB 및 염증성 신호전달의 핵심 음성 조절자로 기능하며, 사이토카인 반응과 세포사 결정에도 영향을 미칩니다. OTULIN 기능의 교란은 단백질 항상성(proteostasis)과 면역 항상성을 무너뜨려, 이 경로를 자가염증성(autoinflammatory) 표현형 및 더 광범위한 염증 질환 기전과 연결합니다. 또한 OTULIN은 선형 유비퀴틴 편집을 통해 수용체 유발 신호의 강도와 지속시간을 미세 조정하는 선천면역 신호 및 스트레스 반응과도 교차합니다.

OTULIN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Otulin 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Otulin 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Otulin의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 OTULIN 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 OTULIN 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Otulin 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• OTULIN 기능에 중요한 Otulin 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Otulin 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• OTULIN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 OTULIN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Otulin 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  OTULIN HDR 플라스미드 (m) 및 OTULIN HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Otulin 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Otulin 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.