OTUB2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-413099

개요

OTUB2(OTU 탈유비퀴틴화 효소, ubiquitin aldehyde binding 2)는 유비퀴틴 신호를 편집해 단백질 안정성과 신호 강도를 조절하는 시스테인 프로테아제 계열의 탈유비퀴틴화 효소(DUB)를 암호화합니다. OTUB2는 특정 유비퀴틴 사슬 결합을 선호적으로 절단함으로써 단백질 항상성(proteostasis), DNA 손상 반응, 스트레스 적응 신호 전달 연쇄를 조절하는 유비퀴틴 의존성 경로에 영향을 미칩니다. OTUB2 활성의 변화는 종양성 신호 프로그램과 염증성 병태생리를 포함한 여러 질환 맥락에서 관찰되는 유비퀴틴 항상성 이상과 연관되어 왔습니다. 그 결과 OTUB2는 유비퀴틴화, 전사 조절, 그리고 세포 생존 결정 사이의 경로 간 상호작용(crosstalk)에 미치는 영향 때문에 자주 연구됩니다.

OTUB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 OTUB2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 OTUB2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 OTUB2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 OTUB2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 OTUB2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 OTUB2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• OTUB2 기능에 중요한 OTUB2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 OTUB2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• OTUB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 OTUB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 OTUB2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  OTUB2 HDR 플라스미드 (h) 및 OTUB2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 OTUB2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 OTUB2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.