Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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OMG CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406746
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- OMG CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド（h）は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA（gRNA）をそれぞれコードするプラスミドのプールです
- gRNA配列は、Cas9を誘導してOMGゲノム座において部位特異的な二本鎖切断（DSBs）を引き起こし、非相同末端結合（NHEJ）を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
- ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ（Creベクター：sc-418923）を用いて選択マーカーを除去することができる。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: OMG 抗体 (E-8): sc-271704
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
OMG CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h) | sc-406746 | 20 µg | $397.00 |
概要
OMG（osteoglycin）は、分泌型の小型ロイシンリッチ・プロテオグリカンをコードしており、細胞外マトリックスの組織化やコラーゲン線維形成に関与して、組織の生体力学的特性や細胞‐マトリックス間シグナル伝達に影響を与えます。マトリックス構造を調節することで、OMGはインテグリンに連結したシグナル経路や増殖因子の利用可能性に影響し、細胞接着、遊走、分化プログラムを形作ります。OMGが関与する細胞外マトリックス再構築の変化は、線維化、心血管リモデリング、腫瘍微小環境の生物学といった文脈で研究されており、これらでは間質の組成が疾患関連の表現型に影響し得ます。こうした特性により、OMGは、ヒトの系においてマトリックス成分が細胞挙動や細胞間コミュニケーションをどのように制御するかを研究するための有用な標的となります。
OMG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOMG遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OMG内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。
このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OMGのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OMGタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。
このCRISPRノックアウトシステムにより、OMGシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OMG欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。
主な特徴
- OMGの機能に不可欠なOMGエクソンを標的とするsgRNA
導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
ノックアウト効率を向上させるための、OMGゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
トランスフェクションによる導入に対応
設計バリエーション
CRISPRs +/- HDR
- OMG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOMG CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OMG遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
OMG HDRプラスミド（h）および OMG HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOMGホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOMG標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。