Odf1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405840

개요

ODF1은 외측 치밀 섬유 단백질 1(Odf1)을 암호화하며, 이는 정소에서 풍부하게 발현되는 구조 단백질로서 정자 꼬리의 외측 치밀 섬유를 구성합니다. Odf1은 편모 운동 시 축사(axoneme)의 안정성과 탄성 반동을 지지합니다. 또한 정자형성 과정(spermiogenesis)과 후기 정자 조립 단계에 관여하여, 주부(principal piece)의 세포골격 조직과 기계적 완전성에 기여합니다. ODF1 의존적 정자 꼬리 구조가 교란되면 운동성 저하 및 남성 요인 불임과 연관된 표현형이 나타나는 것으로 알려져 있어, 무력정자증(asthenozoospermia) 및 관련 정자발생 결함의 기전을 연구하는 데 중요합니다. 제한적인 발현 양상과 특화된 기능은 생식세포에서 분화 의존적으로 조절되는 세포골격 단백질의 조절 메커니즘을 규명하기 위한 집중된 모델을 제공합니다.

Odf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ODF1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ODF1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ODF1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Odf1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Odf1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ODF1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Odf1 기능에 중요한 ODF1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ODF1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Odf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Odf1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ODF1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Odf1 HDR 플라스미드 (h) 및 Odf1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ODF1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ODF1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.