Partículas Lentivirales de Activación (h) Oct3/4: sc-400012-LAC

POU5F1 codifica el factor de transcripción Oct3/4, un regulador central de la pluripotencia que mantiene la autorrenovación y suprime el compromiso hacia linajes mediante un control amplio de redes génicas del desarrollo. Oct3/4 actúa junto con socios como SOX2 y NANOG para configurar los paisajes de potenciadores, modular la accesibilidad de la cromatina y coordinar programas transcripcionales vinculados a la identidad de las células madre. Su actividad se cruza con vías de señalización que influyen en las decisiones de destino celular, incluidas TGF-β/SMAD, WNT/β-catenina y PI3K/AKT, ayudando a equilibrar señales de proliferación y diferenciación. La expresión desregulada de POU5F1 se asocia con estados tipo célula madre en biología del cáncer y se utiliza con frecuencia como marcador molecular en estudios de plasticidad tumoral, reprogramación y modelos de desarrollo humano temprano.

Las partículas de activación lentiviral Oct3/4 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de POU5F1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Oct3/4 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción POU5F1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Oct3/4. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo POU5F1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.