OC-STAMP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406422

概要

OCSTAMPは、破骨細胞どうしの細胞融合および多核化して骨吸収を担う成熟破骨細胞の形成に必須な、多回膜貫通タンパク質であるOC‑STAMPをコードします。OC‑STAMPはDCSTAMPなどの融合制御因子と協調して働き、RANKLによって駆動される破骨細胞形成（osteoclastogenesis）プログラムと統合されることで、分化過程における細胞骨格の再構築や膜動態に影響を与えます。破骨細胞成熟における役割から、OCSTAMP活性の変化は骨格恒常性の研究や、炎症性・代謝性の状況における骨融解性病変を含む、骨吸収の制御異常を特徴とする疾患の研究に関連します。さらに、骨髄系細胞におけるOC‑STAMP発現は、融合能が免疫—骨クロストークや組織リモデリングに与える影響を検討する上でも有用です。

OC-STAMP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOCSTAMP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OCSTAMP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OCSTAMPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OC-STAMPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OC-STAMPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OCSTAMP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OC-STAMPの機能に不可欠なOCSTAMPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OCSTAMPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OC-STAMP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOC-STAMP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OCSTAMP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OC-STAMP HDRプラスミド（h）および OC-STAMP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOCSTAMPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOCSTAMP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。