Nup37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409458

概要

NUP37は、核膜の完全性と選択的な核—細胞質間輸送を支える核膜孔複合体（NPC）のNup107–160サブ複合体を構成する必須因子Nup37をコードしています。核膜孔の組み立てやゲーティングに関与することで、Nup37はRNAの核外輸送、タンパク質の核内輸送、そして適切な核内輸送に依存する転写プログラムの空間的制御に影響を及ぼします。核膜孔の組成が破綻すると、ゲノム安定性や有糸分裂の進行が乱れる可能性があり、これらの過程は増殖性疾患の文脈でしばしば異常をきたします。そのため、NUP37は核内輸送、細胞周期制御、ストレス応答性シグナル伝達を結び付ける経路の研究で広く扱われています。

Nup37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNUP37遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NUP37内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NUP37のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nup37タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nup37シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NUP37欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nup37の機能に不可欠なNUP37エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NUP37ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nup37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNup37 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NUP37遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nup37 HDRプラスミド（h）および Nup37 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNUP37ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNUP37標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。