
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
NUDT5 CRISPR 활성화 플라스미드(m) | sc-424768-ACT | 20 µg | $397.00 |
마우스 Nudt5는 ADP-리보스 및 관련 유도체를 가수분해하여 뉴클레오타이드 대사체 항상성을 조절하는 Nudix 가수분해효소인 NUDT5를 암호화하며, 이를 통해 ADP-리보실화 및 그 하위 신호전달에 필요한 기질의 가용성에 영향을 미칩니다. 뉴클레오타이드 풀의 조절과 ADP-리보스 회전율(turnover) 제어를 통해 NUDT5는 DNA 손상 반응, 크로마틴 조절, 세포 스트레스 적응과 연관된 과정들과 교차합니다. ADP-리보스 대사의 변화는 비정상적인 증식 및 게놈 유지 경로의 이상과 관련되어 왔으며, 따라서 Nudt5는 암 생물학 및 DNA 복구 장애와 대사 재배선이 관여하는 기타 질환에서 기전 연구를 위한 중요한 표적이 됩니다. 마우스 모델에서 Nudt5의 교란은 뉴클레오타이드 신호가 전사 프로그램과 세포 상태 전환에 어떻게 영향을 미치는지 탐구하는 연구를 가능하게 합니다.
NUDT5 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 Nudt5 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
NUDT5 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 인간 세포주에서 Nudt5 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 Nudt5 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 NUDT5 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 Nudt5 위치를 보존하고 내인성 위치에서 NUDT5 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 Nudt5 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 NUDT5 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.