nucleobindin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405167

개요

NUCB1는 분비 경로에 위치하는 칼슘 결합 단백질인 뉴클레오바인딘(nucleobindin)을 암호화하며, Ca2+ 의존적으로 세포내 수송과 단백질 분류를 조절하는 데 관여합니다. NUCB1는 EF-hand 모티프와 내강(lumen) 화물 단백질과의 상호작용을 통해 골지체/소포체(ER) 항상성, 소낭 매개 수송, 그리고 스트레스에 적응하는 분비 반응과 연관되어 왔습니다. NUCB1 발현 변화는 단백질 항상성(proteostasis) 이상 및 세포 스트레스 신호전달이 교란된 다양한 맥락에서 보고되어, 분비 기전, 막 동역학, Ca2+ 조절 경로에 대한 기전 연구에서 중요한 표적으로 여겨집니다. 또한 분비 이상, 단백질 응집, 또는 소기관 스트레스 반응이 병태생리에 기여하는 질환 모델에서도 NUCB1 의존적 과정이 연구되고 있습니다.

nucleobindin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NUCB1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NUCB1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NUCB1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 nucleobindin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 nucleobindin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NUCB1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• nucleobindin 기능에 중요한 NUCB1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NUCB1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• nucleobindin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 nucleobindin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NUCB1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  nucleobindin HDR 플라스미드 (h) 및 nucleobindin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NUCB1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NUCB1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.