NRF-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421961

개요

마우스 Nrf1(NRF-1) 유전자는 전사인자를 암호화하며, 산화적 인산화, 미토콘드리아 DNA 전사·복제 기계, 그리고 세포 에너지 대사에 관여하는 유전자들을 조절함으로써 미토콘드리아 생합성과 호흡 기능에 대한 핵의 조절을 조정한다. NRF-1은 영양분 및 성장인자 신호를 세포주기 진행 및 산화환원 항상성과 통합하여 단백질 항상성(proteostasis)과 대사 스트레스에 대한 적응 반응을 뒷받침한다. 실험 모델에서 NRF-1 의존적 전사 프로그램의 이상 조절은 미토콘드리아 기능 변화 및 산화 스트레스 표현형과 연관되어 왔으며, 이는 신경퇴행, 심장대사 기능장애, 암 관련 대사 재프로그래밍과 같은 현상과 관련성이 있는 것으로 보고되었다. 미토콘드리아-핵 간 상호작용(crosstalk)의 중심 노드로서 NRF-1은 생체에너지 대사, ROS 처리, 그리고 분화 및 스트레스 내성을 형성하는 전사 네트워크를 관장하는 경로에서 자주 연구된다.

NRF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nrf1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nrf1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nrf1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NRF-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NRF-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nrf1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NRF-1 기능에 중요한 Nrf1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nrf1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NRF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NRF-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nrf1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NRF-1 HDR 플라스미드 (m) 및 NRF-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nrf1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nrf1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.