NRAMP 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402423

개요

SLC11A1은 NRAMP1을 암호화하는데, NRAMP1은 양성자 결합형 2가 금속 수송체로서 주로 골수계 세포의 엔도좀 및 파고좀 막과 연관되어 있으며, Fe²⁺와 Mn²⁺의 이동을 조절하고 병원체를 포함한 구획 내 금속 가용성을 형성한다. 소포 내 금속 조성을 조절함으로써 NRAMP1은 항미생물 효과기 프로그램, 산화환원 균형, 그리고 염증 경로 및 항원 처리와 교차하는 선천면역 신호전달에 영향을 준다. SLC11A1의 유전적 변이 또는 발현 변화는 세포내 감염에 대한 감수성 차이 및 염증성 표현형의 조절과 연관되어 있어, 숙주–병원체 상호작용과 면역 조절 연구에서 유용한 유전자 좌위로 여겨진다. 인간 세포 모델에서는 NRAMP1 기능이 대개 대식세포 활성화, 파고좀 성숙, 그리고 미생물의 지속성을 좌우하는 영양 제한 메커니즘의 맥락에서 탐구된다.

NRAMP 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC11A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC11A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC11A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NRAMP 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NRAMP 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC11A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NRAMP 1 기능에 중요한 SLC11A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC11A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NRAMP 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NRAMP 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC11A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NRAMP 1 HDR 플라스미드 (h) 및 NRAMP 1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC11A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC11A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.