Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NPR-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421949
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NPR-C O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NPR-C, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NPR-C Anticorpo (E-5): sc-515449
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NPR-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421949 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Npr3 de camundongo codifica o receptor C de peptídeos natriuréticos (NPR-C), um receptor de membrana que se liga a ANP, BNP e CNP para regular sua disponibilidade e a sinalização a jusante. O NPR-C é amplamente caracterizado como um receptor de depuração que modula a sinalização por cGMP impulsionada por peptídeos natriuréticos ao controlar o turnover do ligante, influenciando assim o tônus vascular, o remodelamento cardíaco, o manuseio renal de sódio e a homeostase de fluidos. Além da depuração de peptídeos, o NPR-C tem sido associado à sinalização relacionada a Gi/adenilil ciclase e à endocitose mediada por receptor em vários tipos celulares. A desregulação de vias mediadas por NPR-C tem sido associada a fenótipos cardiometabólicos e cardiovasculares, tornando o Npr3 um alvo útil para estudos mecanísticos da regulação da pressão arterial e do remodelamento tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NPR-C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Npr3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Npr3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Npr3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NPR-C.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Npr3 para a investigação da sinalização de NPR-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Npr3 críticos para a função NPR-C
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Npr3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NPR-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NPR-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Npr3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NPR-C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NPR-C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Npr3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Npr3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.