NPR-C CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421949

개요

마우스 Npr3는 나트륨이뇨 펩타이드 수용체 C(NPR-C)를 암호화하며, 이는 ANP, BNP, CNP에 결합해 이들 펩타이드의 가용성과 하위 신호전달을 조절하는 막 수용체입니다. NPR-C는 일반적으로 제거(클리어런스) 수용체로 널리 알려져 있으며, 리간드의 턴오버를 조절함으로써 나트륨이뇨 펩타이드에 의해 유도되는 cGMP 신호를 조절하고, 그 결과 혈관 긴장도, 심장 리모델링, 신장의 나트륨 처리, 체액 항상성에 영향을 미칩니다. 펩타이드 제거 기능을 넘어, NPR-C는 여러 세포 유형에서 Gi/아데닐릴 사이클레이스 관련 신호전달 및 수용체 매개 엔도사이토시스와도 연관되어 있는 것으로 보고되었습니다. NPR-C 매개 경로의 조절 이상은 심대사 및 심혈관 관련 표현형과 연관되어 있어, Npr3는 혈압 조절과 조직 리모델링의 기전을 연구하는 데 유용한 표적입니다.

NPR-C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Npr3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Npr3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Npr3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NPR-C 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NPR-C 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Npr3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NPR-C 기능에 중요한 Npr3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Npr3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NPR-C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NPR-C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Npr3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NPR-C HDR 플라스미드 (m) 및 NPR-C HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Npr3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Npr3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.