NOR-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401813
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NOR-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NOR-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NOR-1 Anticorpo (H-7): sc-393902
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NOR-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401813 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NR4A3 codifica o receptor nuclear órfão NOR-1 (NR4A3), um fator de transcrição de resposta imediata, independente de ligante, que acopla rapidamente sinais extracelulares a programas de expressão gênica. O NOR-1 regula a diferenciação, a proliferação, a apoptose e a adaptação metabólica celulares ao modular redes transcricionais a jusante da sinalização MAPK/ERK e de outras vias responsivas ao estresse, e pode influenciar a expressão de genes associados à inflamação e à resposta imune. A atividade desregulada de NR4A3 tem sido associada a fenótipos oncogênicos e metabólicos, e rearranjos de NR4A3 estão implicados em certos sarcomas, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos do controle transcricional em contextos relacionados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NOR-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NR4A3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NR4A3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NR4A3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NOR-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NR4A3 para a investigação da sinalização de NOR-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NR4A3 críticos para a função NOR-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NR4A3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NOR-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NOR-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NR4A3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NOR-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NOR-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NR4A3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NR4A3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.