NMDAζ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400593-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NMDAζ1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NMDAζ1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NMDAζ1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NMDAζ1 Anticorpo (E-2): sc-518043
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NMDAζ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400593-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NMDAζ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400593-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GRIN1 codifica a subunidade ζ1 (GluN1) do receptor NMDA humano, um componente essencial dos receptores ionotrópicos de glutamato do tipo NMDA, que se montam como canais heterotetraméricos para mediar a neurotransmissão excitatória permeável a Ca²⁺. A sinalização do receptor NMDA regula a plasticidade sináptica, a aprendizagem e a memória, e a expressão gênica dependente de atividade por meio de vias que envolvem CaMKII/CREB e programas transcricionais a jusante. A função do receptor dependente de GRIN1 também se cruza com processos do desenvolvimento neuronal, como sinaptogênese e remodelamento dendrítico, e contribui para respostas a estresse excitotóxico em condições de estimulação glutamatérgica excessiva. Variações genéticas ou sinalização desregulada do receptor NMDA têm sido associadas a fenótipos neurodesenvolvimentais e neuropsiquiátricos, sustentando estudos mecanísticos da função do receptor em modelos celulares relevantes para doenças.
NMDAζ1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.