Nkx-3.2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406906

개요

NKX3-2는 홈박스 전사인자 Nkx-3.2를 암호화하며, Nkx-3.2는 핵 내에서 DNA에 결합해 발달 과정의 유전자 발현 프로그램을 조절하는 단백질입니다. 특히 연골형성(chondrogenesis)과 몸통 축(axial) 골격의 패터닝을 조절하는 프로그램에 관여합니다. Nkx-3.2는 BMP 및 TGF-β 계열 신호 등 형태형성인자(morphogen) 신호 전달의 하위에서 전사 네트워크를 조정함으로써 계통(lineage) 지정과 분화를 조절합니다. NKX3-2의 활성이 변화하면 연골 및 골격 발달 결함과 연관되는 것으로 보고되어 왔으며, 선천성 골격 이형성증 및 두개안면 패터닝 기전 연구에서 자주 다뤄집니다. 세포 기반 시스템에서 NKX3-2는 중간엽 분화와 세포외기질 유전자 조절의 전사적 제어를 분석하기 위한 다루기 쉬운 표적(노드)을 제공합니다.

Nkx-3.2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NKX3-2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NKX3-2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NKX3-2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Nkx-3.2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Nkx-3.2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NKX3-2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Nkx-3.2 기능에 중요한 NKX3-2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NKX3-2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Nkx-3.2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Nkx-3.2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NKX3-2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Nkx-3.2 HDR 플라스미드 (h) 및 Nkx-3.2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NKX3-2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NKX3-2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.